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高效液相色譜儀檢測(cè)豬尿中鹽酸克倫特羅的含量

2020.1.08

1.儀器和試劑

高效液相色譜法(hplc)與紫外探測(cè)器。

超聲波水浴,

離心機(jī):4000分/分,

恒溫水浴。

乙醇、乙醚、0.01摩爾/升磷酸二氫鈉溶液;

2mol/l氫氧化鈉溶液:20g氫氧化鈉(極好的純),可溶于250毫升水;

無(wú)水硫酸鈉。

除說(shuō)明外,所有試劑均為純分析試劑。

鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液:儲(chǔ)備溶液,500ug/ml:5毫克克倫特羅鹽酸鹽溶于超純水,加入甲醇lml,再以超純水10ml設(shè)定容量;

工作液:儲(chǔ)存的標(biāo)準(zhǔn)液體被稀釋成2.0 ug/ml工作標(biāo)準(zhǔn)液體,用超純水分兩步。

2.樣品處理

在125毫升的漏斗中排出10米的豬糞,將ph值調(diào)整為11至12(約8滴),用2mol/ml的納米溶液,用30、25毫升乙醚抽出兩次,每次搖動(dòng)2分鐘。分層后,通過(guò)無(wú)水硫酸鈉漏斗(2至3s)將乙醚層(上層)放入100毫升蒸發(fā)盤(pán)中。然后用少量的己醚清洗剪接漏斗,沖洗無(wú)水硫酸鈉。將洗液放入蒸汽碟中,將蒸汽碟放在水面(約60°c)上蒸發(fā)蒸發(fā),然后用60%乙醇溶液將殘?jiān)磧?次。將其放入容器瓶中,并設(shè)置容量2ML,然后用0.5微米雙膜過(guò)濾器離心,用高效液相色譜法測(cè)定。

3.色譜條件

光譜柱:c18,200毫米×4.6毫米,探測(cè)波長(zhǎng):243納米;柱溫:28°c;

注:20 ul;

流動(dòng)相:0.01m ol/l磷酸二氫鈉+甲醇=67+33

流量:0.8毫升/分鐘。

根據(jù)上述色譜條件,采用外部標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)保留時(shí)間進(jìn)行了表征,結(jié)果通過(guò)鹽酸克倫特羅的特征紫外吸收光譜對(duì)樣品的掃描光譜進(jìn)行了證實(shí),然后通過(guò)樣品峰值面積與標(biāo)準(zhǔn)峰值面積的比較,計(jì)算出鹽酸克倫特羅的含量。


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