免疫層析法(immunochromatography)是近幾年來興起的一種快速診斷技術(shù),其原理是將特異的抗體先固定于硝酸纖維素膜的某一區(qū)帶,當(dāng)該干燥的硝酸纖維素一端浸入樣品后,由于毛細管作用,樣品將沿著該膜向前移動,當(dāng)移動至固定有抗體的區(qū)域時,樣品中相應(yīng)的抗原即與該抗體發(fā)生特異性結(jié)合,若用免疫膠體金或免疫酶染色可使該區(qū)域顯示一定的顏色,從而實現(xiàn)特異性的免疫檢測。早孕診斷用的免疫層析試紙條(通常又叫尿妊紙條)是一個成功的例子,該法檢測速度快,一般1～2min可出結(jié)果;靈敏度較高,可達50IU/L;結(jié)果準確可靠,在尿妊診斷中得到廣泛應(yīng)用。以其為例,裝配方法見圖1:在塑料底板上分別將吸尿用玻璃纖維、凍干金標記抗α-HCG玻璃纖維、已固定有抗β-HCG抗體的NC膜及硬質(zhì)吸水濾紙按圖裝配,配件與塑料底板的結(jié)合可用雙面膠或其他黏性材料粘接。裝配好的紙板按縱向剪切,裁成寬度為4mm的條狀,即為尿妊用紙條。尿妊試紙條的快速特性來源于膠體金免疫層析法的固有特性,與原材料選擇特別是NC膜的孔徑大小密切相關(guān),準確性取決于β-HCG的特異性。

膠體金試紙條用于肉眼水平的免疫檢測中,具有以下優(yōu)點:

樣品不需要特殊處理,試劑和樣本用量極小,樣本量可低至1～2μL;

敏感性和特異性高,既可用于抗原檢測,也可用于抗體檢測;時間大大縮短,提高了檢測速度;

操作簡單,不需熒光顯微鏡、酶標檢測儀等貴重儀器,更適于現(xiàn)場應(yīng)用;實驗結(jié)果可以長期保存。

這使其在檢驗檢疫上有很大的應(yīng)用潛力,可以通過制備單克隆抗體或基因工程抗體,將檢疫條約規(guī)定的疾病的抗體做成試紙條,直接檢測血液、拭子、糞便、組織懸液中的病原體,對于旅客、伴侶動物等不便于長期隔離的個體的出入境檢疫在現(xiàn)場就可以完成,檢疫結(jié)果還能備案。

目前在動物疾病診斷中已經(jīng)使用了細小病毒檢測試紙條,如果再將其他傳染病的抗體制備成試紙條,技術(shù)上是成熟的,方法上是可行的,隨著研究工作的開展,膠體金試紙條廣泛用于檢驗檢疫是必然的發(fā)展趨勢。