肉毒中毒的實驗室診斷，從病人的血清、糞便、嘔吐物及可疑食品等樣本中檢測到毒素是最可靠的診斷依據(jù)。在美便、胃腸道物和受傷組織等樣本中檢測或分離到肉毒桿菌，可支持診斷，但不能以此確診。但在一些嬰兒肉毒中毒病例中，只要在糞便或胃腸物中發(fā)現(xiàn)肉毒桿菌，即使在樣本中檢測不到肉毒毒素，也有確診意義。

　　小鼠生物試驗（致死試驗）是國際公認(rèn)的肉毒毒素檢測金標(biāo)準(zhǔn)方法，也是最靈敏的檢測方法，靈敏度可達(dá)1MLD（相當(dāng)于10pg）.雙抗夾心ELISA是美國SDA和AOACinternational批準(zhǔn)的第一個官方認(rèn)可的肉毒毒素檢測方法，靈敏度可達(dá)100pg.在我國針對食品微生物檢驗制定了肉毒桿菌與肉毒毒素的國標(biāo)GB/T4789.12-2003。該標(biāo)準(zhǔn)主要包括：檢測毒素的小鼠致死試驗以及菌落形態(tài)觀察試驗、產(chǎn)毒培養(yǎng)試驗和分離培養(yǎng)試驗等?，F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的缺點是耗費時間長、需使用實驗動物和各型別肉毒毒素的診斷血清。

　　肉毒毒素的檢測方法還包括：禽眼瞼閉合試驗、快速免疫層析試驗、肽鏈內(nèi)切酶ELISA等。禽眼瞼閉合試驗是我國學(xué)者建立的一種新的生物試驗法，靈敏度可達(dá)1ng。基于金標(biāo)記的免疫層析法可在5min內(nèi)出結(jié)果，操作簡單，但靈敏度低（10~50ng），適合現(xiàn)場快速篩查?；陔逆渻?nèi)切酶ELISA是利用肉毒毒素的內(nèi)肽酶活性，結(jié)合免疫學(xué)檢測方法或光譜技術(shù)檢測裂解的底物多肽，或者在底物蛋白上作熒光標(biāo)記，裂解后檢測熒光信號。該方法最大特點是能檢測有活性的毒素，且特異性強、靈敏度高，也可用于毒素分型檢測，值得推廣使用。

　　肉毒桿菌的核酸檢測方法已非常成熟，如PCR、熒光定量PCR以及多重PCR等檢測A~F型肉毒桿菌的試驗方法均有報道。但還沒有肉毒桿菌核酸檢測的國家標(biāo)準(zhǔn)，僅有A、B、E、F型肉毒桿菌PCR檢測的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（SNT2525-2010）。有必要盡快制定A~G型肉毒桿菌的PCR或熒光定量PCR檢測的國家標(biāo)準(zhǔn)，以滿足食品生產(chǎn)企業(yè)的需求。