細(xì)胞核蛋白的免疫熒光染色方法
細(xì)胞免疫熒光的詳細(xì)操作步驟1,取出細(xì)胞爬片放到35mm或60mm用過的細(xì)胞培養(yǎng)皿里,PBS洗三遍。注意有的時候作的細(xì)胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分鐘,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分鐘,PBS洗三遍。4,與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘,PBS洗三遍。5.,一抗4度濕盒內(nèi)過夜,也可37度2小時,感覺前者效果好,PBS洗三遍。6,二抗室溫2小時,或者37度1半小時,PBS洗三遍。7,最好用DAPI染核,然后直接照熒光片。8,蒸餾水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周。
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