首先引物與模板的序列要緊密互補,其次引物與引物之間避免形成穩(wěn)定的二聚體或發(fā)夾結(jié)構(gòu),再次引物不能在模板的非目的位點引發(fā)DNA聚合反應(yīng)(即錯配)。具體實現(xiàn)這 3 條基本原則需要考慮到諸多因素,如引物長度(primer length),產(chǎn)物長度(product length),序列 Tm 值...
為了使生產(chǎn)抗體獲得最佳效果,仔細地設(shè)計抗原肽是很有必要的,設(shè)計應(yīng)滿足一個基本條件:在免疫過程中,該抗原既不會產(chǎn)生過強的免疫反應(yīng),同時又能產(chǎn)生出對感興趣的蛋白有結(jié)合能力的抗體。盡管抗原肽設(shè)計是一個很復(fù)雜的課題,但是有幾點關(guān)鍵的基本設(shè)計原則可以提供給大家參考:1、確定抗體的用途(應(yīng)用)新開展一個研究項目...
為了使產(chǎn)生的抗體獲得最佳效果,仔細地設(shè)計抗原多肽是很有必要的,設(shè)計應(yīng)滿足一個基本條件:在免疫過程中,該抗原既不會產(chǎn)生過強的免疫反應(yīng),同時又能產(chǎn)生出對感興趣的蛋白有結(jié)合能力的抗體??乖O(shè)計是一個很復(fù)雜的課題,有諸多需要注意的細節(jié)。根據(jù)我們所積累的經(jīng)驗,有幾點關(guān)鍵的基本設(shè)計原則可供大家參考:? 確定抗體...
1、TaqMan探針位置盡可能靠近擴增引物,但不能與引物重疊?! ?、長度一般為18~40堿基?! ?、G+C含量控制在40%~80%左右?! ?、避免連續(xù)相同堿基的出現(xiàn),特別是要避免GGGG或更多G出現(xiàn)。 5、在引物的5'端避免使用G?! ?、選用比較多的堿基C?! ?、退火溫度Tm...
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