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WST 361:2011
乳酸脫氫酶催化活性濃度測(cè)定參考方法

Reference method for determination of catalytic activity concentration of lactate dehydrogenase


標(biāo)準(zhǔn)概述

本標(biāo)準(zhǔn)基于IFCC 37℃參考方法制定，規(guī)定了乳酸脫氫酶（LDH）催化活性濃度的測(cè)定流程，為臨床檢驗(yàn)和體外診斷產(chǎn)品提供溯源依據(jù)。

核心測(cè)定參數(shù)

參數(shù)要求
溫度37.0℃±0.1℃
波長(zhǎng)339nm±1nm
樣本體積分?jǐn)?shù)1:23（4.35%）
線性范圍0.22-10.04 ukat/L

關(guān)鍵技術(shù)要點(diǎn)

1. 試劑系統(tǒng)

  • 反應(yīng)溶液：含373.8mmol/L MEG和57.5mmol/L乳酸鋰鹽（pH9.4）
  • 起始試劑：NAD游離酸與鋰鹽混合（36.23mmol/L+6.78mmol/L）

2. 儀器性能要求

分光光度計(jì)需滿(mǎn)足：帶寬≤2nm、光徑10.00mm±0.01mm，溫度控制精度±0.1℃。推薦使用經(jīng)JCTLM認(rèn)證的分光光度系統(tǒng)。

操作流程優(yōu)化

  1. 溫度平衡：所有試劑需37℃預(yù)溫育
  2. 反應(yīng)啟動(dòng)：加入200μL起始試劑后延遲90s讀數(shù)
  3. 數(shù)據(jù)采集：至少6個(gè)連續(xù)監(jiān)測(cè)點(diǎn)（180s）

質(zhì)量控制

指標(biāo)允許范圍
重復(fù)性CV<1.0%
不確定度(k=2)<1.5%
試劑空白率ΔA/min<0.001

與30℃方法對(duì)比

  • 靈敏度提升：37℃反應(yīng)速率較30℃提高約1.3倍
  • 基質(zhì)改進(jìn)：采用NAD游離酸/鋰鹽混合體系穩(wěn)定pH
  • 溯源強(qiáng)化：擴(kuò)展不確定度從2.0%降至1.5%

實(shí)施建議

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立：①每日用氧化鈥玻璃驗(yàn)證波長(zhǎng)準(zhǔn)確性；②每月校準(zhǔn)點(diǎn)式溫度計(jì)；③每批次測(cè)定JCTLM參考物質(zhì)驗(yàn)證系統(tǒng)準(zhǔn)確性。

 

請(qǐng)注意，本內(nèi)容不等同于標(biāo)準(zhǔn)原文，內(nèi)容僅供參考，本站不保證內(nèi)容的正確性。準(zhǔn)確、完整的信息請(qǐng)參閱正式版文本。

 

 

WST 361:2011

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標(biāo)準(zhǔn)號(hào)
WST 361:2011
發(fā)布
2011年
總頁(yè)數(shù)
23頁(yè)
發(fā)布單位
國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)
當(dāng)前最新
WST 361:2011
 
 

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